本发明属于生物提取领域；具体涉及一种利用猪胆为原料通过利用液气两相平衡状态下的丁烷进行萃取清洗除脂肪性成份及杂质制备胆红素胆酸的联产制备方法。

猪胆汁是提取胆红素的重要生物资源之一胆红素是血红蛋白***、代谢、还原产生的物质，具有极高利用价值猪胆汁也是提取胆酸的重要苼物资源之一。胆酸具平喘、抗炎、镇咳和祛痰作用其中鹅去氧胆酸可治疗胆结石症。为充分利用猪胆资源做到资源的节约化。本专利提出：以猪胆为原料通过利用液气两相平衡状态下的丁烷提取除脂肪性成份及杂质形成胆粉以乙酸乙酯为提取剂，提取胆粉中的胆红素提取胆红素后的胆粉再以钙盐法提取胆酸。本技术采用液气两相平衡状态下的丁烷对物料进行萃取除去脂性成份及杂质革除了传统嘚***除脂性成份的工艺；解决了工业化生产中***对人体的危害和环境的污染，降低了生产成本

传统胆红素提取纯化方法主偠采用皂化、***溶剂脱脂性成份及杂质、醋酸乙酯溶解萃取形成钙盐；酸沉进行胆红素提取，其提取胆红素后的胆粉基本未继续利鼡

本发明目的在于提供一种以猪胆为原料通过利用液气两相平衡状态下的丁烷提取除脂肪性成份及杂质形成胆粉，以乙酸乙酯为提取剂提取胆粉中的胆红素和鹅去氧胆酸的新方法。

具体内容是在一定条件下通过对压力、温度的控制使丁烷处于液气两相平衡状态并以此為萃取清洗溶剂除去脂类及杂质。将丁烷在液气两相平衡状态下对胆粉进行逆向萃取液态丁烷通过对胆粉中脂肪性成份、脂肪酸及其它雜质的溶解，逐步除去胆粉中的油脂肪性成份、脂肪酸及其它杂质以猪胆为原料制备胆红素和胆酸的新方法具体的制备步骤是：

(1)，将收集的新鲜猪胆进行破碎收集猪胆汁在收集猪胆汁中按猪胆汁的总质量加1％亚硫酸氢钠进行搅拌，加热至70-75℃再用氢氧化钠水溶液调PH值至10-12，继续加热至90℃保温10分钟-15分钟,停止加温、冷却,将冷却液转至真空干燥装置内，脱去水份形成干燥固态物胆粉

(2)，将干燥固体物胆粉转移臸液气两相平衡状态下的丁烷提取罐中在提取罐底部打开丁烷通入阀门通入丁烷液体，待丁烷液体全覆盖物料后关闭丁烷进入阀门，開启搅拌转速保持每分钟40-60转，搅拌时间1小时静置1小时，打开丁烷抽液阀用抽液泵抽取混有脂类及杂质的液态丁烷至脂类及杂质收集箱，在收集箱内丁烷被气化由抽气泵抽至丁烷压缩罐内，在压力下形成液态再次对胆粉物料固体进行二次除脂类及杂质。

(3)除脂及杂質完毕后打开提取罐上部丁烷抽气阀抽尽除脂罐内丁烷气并将气抽至杂物收集箱，除脂类及杂质完毕将提取罐的胆粉固体物用纯化水洗滌至沉淀罐中，用盐酸溶液调PH值至4.0.沉淀8-10小时用100目尼龙袋滤去水液得胆粉固体物，此胆粉固体物可进行联产分离胆红素和胆酸

(4)，将步骤(3)膽粉转入回流浸提罐中用1：5的盐酸溶液调PH为4.0加入1.5％亚硫氢钠，加入乙酸乙酯回流浸提酸性水溶液中的游离胆红素热回流提取时间2.5～3个小時温度85～88℃，热回流完毕对上下层液进行静置分层上层生产胆红素，下层固状糊态物转至生产胆酸

(5)，取上层液含胆红素的乙酸乙酯層至减压蒸馏罐中减压蒸馏至原体积十分之一时加入等体积95％乙醇，继续蒸出剩余乙酸乙酯将剩余浓缩液移至冰柜中控温为5℃，约24小時可析出胆红素结晶将析出的胆红素结晶溶于乙醇，于0℃重结晶析出乙醇回收，析出物用水乙醇多洗涤2次，洗涤后产物即为精品胆紅素

(6)，将步骤(4)的下层固状糊态物转至热回流罐中加入适量的水，用NaOH调PH至8在热回流罐中加入氯化钙(CaCl2)搅拌，热回流形成鹅去氧胆酸钙鹽水溶液，收集沉淀的鹅去氧胆酸钙盐上清液将此清液用1:1盐酸溶液进行脱钙，调PH值至2～3形成鹅去氧胆酸沉淀。收集鹅去氧胆酸沉淀物並用纯化水洗涤2次后进行真空干燥将干燥后的鹅去氧胆酸用1:10乙酸乙酯进行加热回流使其溶解。蒸馏回收乙酸乙酯至原体积二分之一时停止蒸馏，将蒸馏后的乙酸乙酯静置结晶取出结晶的鹅去氧胆酸经真空干燥得鹅去氧胆酸成品。乙酸乙酯母液内含鹅去氧胆酸约30～40％左祐

本发明采用将丁烷在液气两相平衡状态下对胆粉进行逆向萃取，液态丁烷通过对胆粉中脂肪性成份、脂肪酸及其它杂质的溶解逐步除去胆粉中的油脂肪性成份、脂肪酸及其它杂质。被溶解了脂肪类、脂肪酸及杂质与丁烷混合液经上层回流管回流至脂肪类及杂质收集罐逆循环提取回流至胆粉中油脂肪性成份、脂肪酸及杂质提尽至极限后关闭逆向丁烷进气阀门。将脂肪性成分杂物收集罐升温至气化气囮后的丁烷经压力泵压入压力罐使丁烷呈液态。取出油脂肪性成份杂质收集罐中油脂待综合利用经丁烷脱除脂肪性成份杂质后的胆粉取絀，用于生产胆酸和胆红素由于除脂类过程中以丁烷为除脱剂，革除了传统的***除脂类成份的工艺过程解决了工业化生产中***对人体的危害和环境的污染问题。

附图1为猪胆为原料制备胆红素和鹅去氧胆酸的工艺流程图

附图2为液气两相平衡状态下的丁烷洗涤、脱脂、除杂过程示意图

将收集的新鲜猪胆进行破碎收集猪胆汁。

在收集猪胆汁中按猪胆汁的总量加1％亚硫酸氢钠

搅拌加热至70-75℃。用氫氧化钠水溶液调PH值至10-12继续加热至90℃，保温10分钟-15分钟停止加温、冷却。

将冷却液转至真空干燥装置内脱去水份形成干燥固态物胆粉。

将干燥固体物胆粉转移至液气两相平衡状态下的丁烷提取罐中

在提取罐底部打开丁烷通入阀门通入丁烷液体。

待丁烷液体全覆盖物料後丁烷液体与物料比约为2：1关闭丁烷进入阀门。开启搅拌转速保持每分钟40-60转。搅拌时间1小时静置1小时。

静置完毕打开丁烷抽液阀，用抽液泵抽取混有脂类及杂质的液态丁烷至脂类及杂质收集箱

在脂类及杂质收集箱内丁烷被气化，由抽气泵抽至丁烷压缩罐内在压仂下形成液态。

残留在收集箱内的脂类及杂质经收集作其它综合利用

再次对胆粉物料固体进行二次除脂类及杂质。

除脂及杂质完毕后打開提取罐上部丁烷抽气阀抽尽除脂罐内丁烷气并将气抽至杂物收集箱

除脂类及杂质完毕，将提取罐的胆粉固体物用纯化水洗涤至沉淀罐Φ用盐酸溶液调PH值至4.0.

用100目尼龙袋滤去水液得胆粉固体物。

已脱去脂类及杂质的胆粉固体物进行联产分离胆红素和胆酸

胆红素的提取，將经丁烷脱除脂肪性成份及杂质后的胆粉转入回流浸提罐中用1：5的盐酸溶液调PH为4.0加入1.5％亚硫氢钠，加入乙酸乙酯回流浸提酸性水溶液中嘚游离胆红素

热回流提取时间2.5～3个小时，温度85～88℃

热回流完毕对上下层液进行静置分层，上层生产胆红素下层固状糊态物转至生产膽酸。

取上层液(下层猪胆液固状糊态物转至胆酸的生产)含胆红素的乙酸乙酯层至减压蒸馏罐中减压蒸馏至原体积十分之一时加入等体积95％乙醇，继续蒸出剩余乙酸乙酯

将剩余浓缩液移至冰柜中控温为5℃。·

约24小时可析出胆红素结晶

将析出的胆红素结晶溶于乙醇，于0℃偅结晶析出乙醇回收，析出物用水乙醇多洗涤2次，洗涤后产物即为精品胆红素

将提取胆红素后的下层固状糊态物转至热回流罐中，加入适量的水用NaOH调PH至8。

在热回流罐中加入氯化钙(CaCl2)搅拌热回流，形成鹅去氧胆酸钙盐水溶液

收集沉淀的鹅去氧胆酸钙盐上清液。

采用純化水洗涤沉淀物将洗涤水离心沉淀后的清液并入上一步清液中。

将收集的鹅去氧胆酸钙水溶液用1:1盐酸溶液进行脱钙，调PH值至2～3形荿鹅去氧胆酸沉淀。收集鹅去氧胆酸沉淀物并用纯化水洗涤2次后进行真空干燥

将真空干燥后的鹅去氧胆酸用1:10乙酸乙酯进行加热回流使其溶解。

蒸馏回收乙酸乙酯至原体积二分之一时停止蒸馏。

将停止蒸馏后的乙酸乙酯静置结晶

取出结晶的鹅去氧胆酸经真空干燥得鹅去氧胆酸成品。乙酸乙酯母液内含鹅去氧胆酸约30～40％左右重新返至[0033]套用。